亚洲日韩av无码中文字幕美国_蜜臀亚洲AV无码精品国产午夜._女厕脱裤撒尿大全视频_护士人妻HD中文字幕

咨詢熱線

15000266580

當前位置:首頁  >  技術文章  >  細胞傳代的一般方法

細胞傳代的一般方法

更新時間:2012-02-28      點擊次數:2938

 

傳代的一般方法
開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養液(MEM-0.2%LH培養液或MEM培養液或199等適合細胞有要求的培養液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。
用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20 ml)(以上用具需經121℃至少15分鐘高壓滅菌)
C02孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、—20℃冰箱
操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養液100ml內,加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸氫鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液*覆蓋細胞表面。至細胞*脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養液重復吹打一次后分裝,然后補加至所需培養量。加塞,置于37±1℃孵箱培養。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。

 

聯系方式

郵箱:xiangfbio@163.com

地址:上海市虹口區四平路710號7層

咨詢熱線

400-821-8510

(周一至周日9:00- 19:00)

在線咨詢
  • 掃一掃 微信咨詢

Copyright©2024 上海復祥生物科技有限公司 All Right Reserved        sitemap.xml
技術支持:    管理登陸